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一、为何我的样本背景如此强烈且非特异性染色如此严重？ 1. 样本因素，部分样本如肝、肾等，其内源性生物素水平较高，易与SABC结合，引发非特异性染色；而如皮肤、肺等组织，因其胶原含量丰富，胶原带负电，容易吸附试剂，同样导致非特异性染色。 2. 切片干燥引发的边缘效应，需确保组织表面保持湿润状态。 3. 抗体浓度偏高，建议适当降低抗体浓度。 4. 组织处理过程中存在出血或坏死区域。 5. 洗涤步骤不充分，需增强洗涤效果。 6. 显色剂

在SCI论文的评审流程中，审稿人提议增添实验数据是屡见不鲜的环节。面对这一情形，作者往往面临两种策略：实施额外实验或维持原状。这两种路径各有其利弊，需依据实验的可行性、研究的核心目标及论文的整体布局来谨慎抉择。 01选择实施额外实验 当审稿人建议增加实验时，其初衷往往在于通过更详尽的数据支撑或实验验证来提升研究的精确度和说服力。若你倾向于采纳此建议，需考量以下几个维度： • 实验结果的预期价值：额外实验的结果

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一、实验操作流程 1. 细胞培育环节 • 接种：实验初始，选取六孔板作为培养容器，每孔接种约1000个细胞，并设立2-3组平行对照，以确保数据的可靠性。每隔三日更换新鲜培养液，并持续监测细胞状态。 • 密度控制：保持细胞密度适中是成功的关键，需确保细胞在培养板上均匀分布，低倍镜下观察，每个视野内细胞数量建议维持在1-3个，以促进单个克隆的形成。 •培养周期：经过大约两周的培养，细胞群落将逐渐汇聚，每个群落包含约50个细胞，并

流式细胞术（flow cytometry，FCM）是一种可在细胞或分子水平，对单细胞和亚细胞结构进行快速检测、分析或分选的多功能生物技术。由于其具有可对大量细胞进行高通量检测、可对单个细胞进行多参数分析，和能够同时进行细胞分析和细胞分选等优势，FCM在生物医学基础研究和临床研究中得到了广泛应用。 FCM在20世纪50年代被首次提出，并在此后得到快速发展和广泛应用，这得益于生物样品液流技术、细胞分选计数技术以及计算机数据采集与信号分析

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　　近期是过敏性鼻炎的多发期，本人于2017年8月7日上午挂内蒙古医科大学附属医院耳鼻喉科门诊专家陶

C57小鼠的由来 C57BL作为小鼠品系中广泛应用的代表，其名称中的BL源自英文Black，意指该品系小鼠以黑色外观显著区别于其他品系。 C57BL涵盖多个科研常用的亚系，如C57L、C57BL/6、C57BL/10，其中C57BL/6尤为普遍，这些小鼠常被简称为黑鼠或黑色小鼠。但需注意的是，此类称呼易引起混淆：提及实验用黑小鼠时，虽常指C57BL/6，却非绝对。 另外，C57BL/6亚系内还包含多种基因型小鼠，其命名习惯是在6后附加字母，例如C57BL/6J、C57BL/6N，因此仅凭黑色外观无法确

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工作两年学姐分享 1、口袋书：有协和有临床速查，自己感受下来这本书更好用，直接对着医嘱看。 2、手电筒笔：检查瞳孔和口腔的。有时候有伤口清创也会需要。 3、文件夹：我这个是a6的，能很好放进白大褂口袋，而且纸就用a4纸对折两次就可以。 4、独立包装的口罩：有时候xx会不让拿，或者每次拿都盯着，不太舒服，还是自己买。 5、听诊器：遇到特殊病人可以合着老师一起听一听，并且一人一用更卫生。

1. 上样：样品加载： 上样量：细胞：10ug，组织：20ug，标记物上样量：2ul。 2. 电泳：分离胶浓度：常见有10%、9%和6%（大分子量选用浓度较低的胶，小分子量则相反）。浓缩胶浓度：5%。 电泳缓冲液配制：将100ml母液加入900ml蒸馏水，再加入1g SDS。 电泳条件：运行浓缩胶条件为80v，40min；运行分离胶条件为120v，50min。 3. 转膜：电转液：100ml母液+700ml蒸馏水+200ml甲醇（1）将PVDF膜在100%甲醇中浸泡10秒至15秒。 （2）倒入配置好的转印缓冲液于平底托盘中，将

分子克隆实验——无缝克隆 今天和大家讲讲无缝克隆常见的问题以及解决方法。 1.平板上很少或者没有克隆菌落 建议使用试剂盒附带的阳性对照，可排除试剂盒本身的影响。进一步判定，主要有以下可能的情况和建议： 01载体制备 线性化载体和插入片段的纯度不够，抑制反应。 02插入片段制备 1、引物设计不正确：同源臂15~25nt（不计算酶切位点）,CG含量40~60%。 2、线性化载体和插入片段的纯度不够，抑制反应。若线性化载体与插入片段已经过纯化，

细胞集落形成实验是检测培养细胞增殖能力的有效方法之一,通过计算集落形成率(colony forming efficiency),来测定测试细胞的增殖能力。 实验前准备:6孔板、吸管、枪头、血球计数板、基质胶等放入超净工作台消毒30min。 1、平板集落形成实验(适用于贴壁细胞) ①取出贴壁率>90%的细胞(处于对数生长期),消化离心,重悬细胞并进行细胞计数。 ②6孔板种板:实验分组,每个孔中加入1000个细胞,放入CO2培养箱培养。 ③培养1周后,当肉眼可见集落形成时,取出6孔板,弃

什么是RNA提取 细胞中的RNA可以分为信使RNA、转运RNA和核糖体RNA三大类,不同组织总RNA提取的实质就是将细胞裂解,释放出RNA,并通过不同方式去除蛋白,DNA等杂质,最终获得高纯度RNA产物的过程。 RNA提取的使用目的 通过总RNA提取可获得高纯度及高质量的总RNA,可用于实时荧光定量PCR、Northern blot、microRNA检测、芯片分析, DNA文库构建,基因克隆等实验。RNA用于不同的后续实验,其质量要求不尽相同。 cDNA文库构建要求RNA完整而无酶反应抑制物残留; Northern对RNA完整

脓毒血症是机体神经、免疫、内分泌、凝血等系统功能严重受损后,其中各种有害性刺激(主要是外源性微生物)可激活机体免疫细胞,导致大量促炎细胞因子,生成和释放,进而引起炎症的瀑布样级联反应,在全身炎性反应的进行性加重方面起关键作用。 目前在脓毒血症的研究已达分子水平,临床上治疗手段也日趋完善,但脓毒血症、脓毒血症休克、多器官功能不全乃至最终多器官功能衰竭,仍是外科危重患者死亡的主要原因。 本文介绍一种简单的盲肠结扎穿刺